图书介绍
医学生物化学与分子生物学实验技术双语教程PDF|Epub|txt|kindle电子书版本下载
- 苏燕,席海燕主编;张学明,李斌,丁海麦副主编 著
- 出版社: 北京:人民军医出版社
- ISBN:9787509186367
- 出版时间:2015
- 标注页数:188页
- 文件大小:9MB
- 文件页数:197页
- 主题词:医用化学-生物化学-实验-双语教学-医学院校-教材;医学-分子生物学-实验-双语教学-医学院校-教材
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图书目录
第1章 概论1
第一节 常用生物化学与分子生物学实验方法1
一、分光光度法1
二、层析3
三、电泳6
四、离心技术9
第二节 常用生物化学与分子生物学仪器设备的基本操作10
一、实验室基本操作技能10
二、实验室常用仪器的使用方法12
第三节 实验样品的制备18
一、血液样品的制备18
二、尿液样品的制备18
三、组织样品的制备19
四、微生物样品的制备19
附录A 实验室规则19
附录B 实验室安全20
附录C 实验记录及实验报告20
附录D 实验室用水的种类和标准21
第2章 蛋白质实验23
一、蛋白质分离纯化的原则23
二、蛋白质分离纯化的一般程序24
三、蛋白质的浓缩、干燥和保存27
四、蛋白质的定量和定性分析27
五、蛋白质的鉴定28
实验1 蛋白质的分离纯化29
实验1-1 盐析法分离血浆白蛋白29
实验1-2 分子筛层析(凝胶过滤)31
实验1-3 亲和层析纯化胰蛋白酶34
实验1-4 离子交换层析39
实验1-5 醋酸纤维薄膜电泳分离血浆蛋白42
实验1-6 聚丙烯酰胺凝胶电泳分离血浆蛋白45
实验2 蛋白质定量50
实验2-1 考马斯亮蓝染色法测定蛋白质含量50
实验2-2 双缩脲法测定蛋白质含量52
实验2-3 Folin-酚试剂法(Lowry法)56
实验2-4 紫外分光光度法59
实验2-5 二喹啉甲酸法(BCA法)测定蛋白质含量62
实验3 蛋白质鉴定——蛋白质印迹法64
第3章 酶学实验69
一、酶的分离纯化69
二、酶活力测定70
三、同工酶71
实验4 影响酶促反应速度的因素71
实验5 血清淀粉酶活性的测定78
实验6 米氏常数的测定80
实验6-1 酸性磷酸酶的提取及Km测定82
实验6-2 碱性磷酸酶的提取及Km测定84
第4章 物质代谢实验89
一、物质代谢的研究方法89
二、物质代谢相关性疾病的常用生物化学与分子生物学诊断方法91
实验7 邻甲苯胺法测定血糖浓度92
实验8 葡糖氧化酶法测定血糖浓度95
实验9 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳98
实验10 转氨基作用(纸层析法)101
实验11 血尿素氮测定106
第5章 核酸实验110
第一节 核酸的提取、鉴定和保存110
一、核酸的分离、提取和纯化110
二、核酸的鉴定113
三、核酸的保存113
四、常用核酸的提取方法113
第二节 核酸扩增115
一、聚合酶链反应的基本原理115
二、PCR反应体系116
三、PCR技术的主要类型和应用117
第三节 分子杂交117
一、DNA印迹118
二、RNA印迹119
三、蛋白质印迹119
四、原位杂交120
五、菌落杂交120
六、斑点杂交120
第四节 核酸的测序技术121
一、Sanger双脱氧链终止法121
二、Maxam-Gibert化学降解法122
三、全自动的DNA测序法123
第五节 基因芯片技术123
第六节 酵母杂交系统124
一、酵母双杂交系统124
二、酵母单杂交系统125
三、酵母三杂交系统126
第七节 DNA重组技术126
一、DNA重组技术的基本要素127
二、DNA重组技术的基本流程128
三、DNA重组技术的支撑技术131
实验12 核酸提取132
实验12-1 血液基因组DNA的提取132
实验12-2 大鼠肝脏RNA的提取134
实验13 基因扩增136
实验13-1 应用PCR技术扩增血红蛋白β基因136
实验13-2 从总RNA中采用逆转录PCR扩增GAPDH139
实验14 核酸凝胶电泳142
实验14-1 核酸琼脂糖凝胶电泳142
实验14-2 核酸聚丙烯酰胺凝胶电泳145
实验15 核酸杂交150
实验15-1 DNA印迹杂交150
实验15-2 RNA印迹杂交155
实验16 大肠杆菌的培养及感受态细胞的制备159
实验17 质粒提取162
实验17-1 碱裂解法小量提取质粒DNA162
实验17-2 碱裂解法大量提取质粒DNA166
实验18 聚乙二醇沉淀法纯化质粒DNA170
实验19 DNA的琼脂糖凝胶电泳回收173
实验20 目的基因与载体的连接176
实验21 电转化法制备感受态细胞178
实验22 转化子的鉴定181
实验23 质粒DNA的酶切鉴定183
第6章 特色创新实验187
实验24 异常血红蛋白的筛查187
实验25 血红蛋白电泳释放实验192
第7章 实验设计197
一、实验设计的基本要素197
二、实验设计的基本原则198
三、实验构思与设计198
四、实验设计的基本内容199
五、撰写实验方案199
六、考核评价199