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生物化学与分子生物学实验教程
  • 任颖,柳春主编 著
  • 出版社: 北京:清华大学出版社
  • ISBN:9787302281863
  • 出版时间:2012
  • 标注页数:88页
  • 文件大小:8MB
  • 文件页数:97页
  • 主题词:生物化学-实验-医学院校-教材;分子生物学-实验-医学院校-教材

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图书目录

第1部分 实验基本知识1

一、生物化学实验室规则1

二、实验报告的书写要求1

第1章 实验基本操作3

一、玻璃仪器的洗涤与干燥3

二、吸量管的使用4

三、移液器的使用5

四、液体的混匀8

第2章 实验样品的制备9

一、血液样品的制备9

二、尿液的收集10

三、组织样品的制备11

第3章 常用的实验方法与技术12

第1节 分光光度法12

一、分光光度技术的基本原理12

二、分光光度法的应用13

三、分光光度计的基本结构14

四、常用分光光度计的使用方法14

第2节 电泳技术16

一、电泳技术的基本原理16

二、常用的电泳方法16

三、电泳技术的应用17

四、电泳技术使用的相关仪器18

五、电泳的基本操作方法18

第3节 层析技术19

一、吸附层析19

二、分配层析21

三、离子交换层析21

四、凝胶过滤层析22

五、亲和层析23

第4节 离心技术23

一、沉降系数24

二、离心速度与离心力24

三、制备性超速离心分离方法24

四、普通离心机使用时的注意事项25

第5节 印迹技术26

一、生物大分子凝胶电泳分离26

二、固相支持物的选择26

三、转移26

四、常用的几种印迹方法27

第2部分 生物化学实验29

实验1 蛋白质的呈色和沉淀反应29

一、蛋白质呈色反应29

二、蛋白质的沉淀反应29

实验2 蛋白质含量测定32

一、Folin-酚试剂法(Lowry法)32

二、考马斯亮蓝染色法33

实验3 蛋白质等电点的测定34

实验4 凝胶层析分离法分离血红蛋白与溶菌酶35

实验5 肝组织中核酸的分离与鉴定37

实验6 酶的特异性39

实验7 影响酶促反应的因素40

一、温度对酶活性的影响40

二、pH对酶活性的影响41

三、激活剂、抑制剂对酶促反应的影响41

实验8 食物中维生素C的提取和定量42

实验9 胡萝卜素柱层析分离法43

实验10 血糖含量的测定44

一、邻甲苯胺改良法44

二、葡萄糖氧化酶法46

实验11 胆固醇氧化酶法测定血清总胆固醇46

实验12 血清尿素氮测定(二乙酰一肟法)47

实验13 血清蛋白醋酸纤维素薄膜电泳49

实验14 血清脂蛋白琼脂糖凝胶电泳51

实验15 转氨基作用与氨基酸纸层析51

实验16 血清谷丙转氨酶的活性测定53

实验17 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量55

第3部分 分子生物学基本实验方法60

实验1 基因组DNA的分离提取60

实验2 质粒DNA的提取61

实验3 核酸浓度的测定63

实验4 琼脂糖凝胶电泳检测DNA64

实验5 DNA的酶切65

实验6 DNA重组、转化与鉴定68

实验7 Southern印迹转移71

实验8 Western blot检测蛋白质74

实验9 RT-PCR76

第4部分 附录79

附录1 实验室安全及防护知识79

一、实验室安全知识79

二、实验室灭火法79

三、实验室急救80

附录2 分子生物学实验中的常用试剂及溶液、缓冲液的配制80

一、常见市售酸碱的浓度80

二、有机试剂的配制81

三、细菌培养基和抗生素81

四、常用缓冲液的配制83

五、常见限制性内切酶酶切位点及缓冲液86

附录3 常用计量单位及符号87

附录4 希腊字母表87

参考文献88

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