图书介绍
苏云金芽孢杆菌Cry1类毒素免疫广谱检测技术研究PDF|Epub|txt|kindle电子书版本下载
- 焦凌霞，刘媛，刘贝贝著 著
- 出版社： 北京：中国农业出版社
- ISBN：9787109244641
- 出版时间：2018
- 标注页数：103页
- 文件大小：9MB
- 文件页数：114页
- 主题词：苏云金杆菌－类毒素－免疫测定－研究
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苏云金芽孢杆菌Cry1类毒素免疫广谱检测技术研究PDF格式电子书版下载
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图书目录
第一章 绪论1
一、Cry毒素的分类和命名2
二、苏云金芽孢杆菌Cry毒素的结构与功能3
三、苏云金芽孢杆菌制剂及其转基因产品存在的风险4
四、苏云金芽孢杆菌Cry毒素检测技术6
（一）生物测定法7
（二）PCR扩增检测法7
（三）分子杂交技术8
（四）免疫学检测方法9
五、抗体的发展13
六、噬菌体抗体库技术15
七、抗体基因的体外高频突变技术19
第二章 人源化抗苏云金芽孢杆菌Cry1Ab毒素单域抗体的筛选及活性鉴定21
一、材料与方法22
（一）材料与试剂22
（二）方法24
二、结果与分析27
（一）特异性重组噬菌体单域抗体的富集27
（二）单克隆ELISA方法筛选阳性重组噬菌体28
（三）菌液PCR结果28
（四）噬菌体单域抗体的氨基酸序列比对29
三、讨论30
四、结论31
第三章 同源建模结合点突变技术构建单域抗体定点饱和突变库32
一、材料与方法33
（一）试验材料33
（二）实验方法34
二、结果与分析37
（一）同源建模及分子对接37
（二）关键氨基酸结合热点分析39
（三）重叠延伸PCR结果40
（四）阳性克隆菌落PCR验证41
（五）重组子双酶切验证42
（六）突变库构建及鉴定42
三、讨论43
四、结论45
第四章 苏云金芽孢杆菌（Bt）Cry1类毒素共性结构域的分析定位47
一、材料与方法48
（一）材料48
（二）方法49
二、结果与分析50
（一）序列比对50
（二）模板的确定和序列比对51
（三）同源建模及模型评价52
（四）5种Cry1类毒素的模型比较54
三、讨论55
四、结论56
第五章 苏云金芽孢杆菌（Bt）Cry1类毒素共性结构域的原核表达、纯化及鉴定57
一、材料与方法58
（一）材料58
（二）方法59
二、结果与分析61
（一）共性结构域基因的克隆与序列分析61
（二）pET-26b-DomainⅠ表达载体的构建及鉴定62
（三）共性结构域蛋白的表达与纯化63
（四）Western blot、ELISA和抗原性分析64
三、讨论65
四、结论66
第六章 Cry1类毒素的广谱抗体筛选、鉴定及广谱特异性分析67
一、材料与方法67
（一）材料67
（二）方法69
二、结果与分析73
（一）抗Cry1类毒素的广谱抗体的筛选73
（二）Cry1类毒素广谱抗体阳性克隆的鉴定74
三、讨论78
四、结论80
参考文献81
附录96
附录1 试验培养基及相关试剂的配方96
附录2 核酸电泳相关试剂配方97
附录3 SDS-PAGE相关试剂配方97
附录4 SDS-PAGE操作步骤98
附录5 His Trap HP镍亲和柱缓冲液试剂99
附录6 ELISA试验所用缓冲液和试剂100
附录7 Western blot试验所用缓冲液及试剂配方101
缩写符号说明102
后记103