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第一章 常用生物检测试剂及器皿1

第一节 常用器皿及其清洁方法1

一、常用器皿1

二、常用器皿的清洗和消毒方法5

第二节 试剂的质量标准与溶液的浓度9

一、试剂的质量标准9

二、溶液浓度的表示方法9

第三节 常用缓冲液与贮液的配制10

一、配制缓冲液与贮液的注意事项10

二、常用缓冲液与贮液的配制10

第四节 常用抗生素16

第五节 葡萄球菌A蛋白（SPA）的制备17

一、SPA的基本特性17

二、SPA菌株的培养18

三、SPA的提取、纯化与鉴定18

四、SPA在动物疫病检测中的应用20

第二章 病原学检测技术23

第一节 病原学检测技术的应用与发展23

第二节 病原微生物检测的特点和影响因素23

一、病原微生物检测对象的特点23

二、病原微生物检测的特点24

三、病原微生物检测的影响因素25

第三节 病原微生物检测实验室设施与设备要求25

一、微生物学检测实验室设施要求26

二、病原微生物检测实验室设备要求30

第四节 病原体分离培养与接种技术38

一、消毒与灭菌技术38

二、培养基的制备技术41

三、病原微生物培养与接种技术49

第五节 检测标本制作技术57

一、标本的采集58

二、标本固定58

三、标本染色60

四、标本脱水60

五、标本透明60

六、标本封固61

第六节 显微镜检测技术61

一、显微镜61

二、常用检测方法62

第七节 病原体染色技术63

一、革兰染色法63

二、萋-纳抗酸染色法64

三、结核杆菌金胺“O”染色法65

四、布鲁菌柯兹罗夫斯基染色法65

五、墨汁染色法65

六、Fontana镀银染色法66

七、乳酸酚棉蓝染色法66

八、墨汁硫堇染色法66

九、姬氏染色法67

十、瑞氏染色法67

十一、瑞氏与姬氏复合染色67

十二、碘液染色法68

十三、金胺-酚染色法68

十四、卡红染色法68

十五、苏木素染色法69

十六、伊红染色法71

十七、特殊结构的染色方法71

第八节 不染色标本检查73

第九节 细菌L型检查73

第十节 常见致病性细菌的培养和鉴定75

一、球菌75

二、肠道细菌77

三、弧菌属、弯曲菌属和螺杆菌属81

四、非发酵菌和其它革兰阴性杆菌83

五、需氧革兰阳性杆菌84

六、分枝杆菌属86

七、厌氧菌89

八、螺旋体91

九、支原体、衣原体和立克次体92

第十一节 常见致病性真菌的培养和鉴定93

一、真菌学检验基本技术93

二、常见浅部真菌培养和鉴定96

三、常见深部真菌培养和鉴定98

第三章 免疫学检测技术100

第一节 检测抗原制备技术100

第二节 检测抗体制备技术102

一、多克隆抗体制备技术102

二、单克隆抗体制备技术104

第三节 免疫凝集试验110

一、直接凝集试验110

二、间接凝集试验112

第四节 免疫电泳技术115

一、对流免疫电泳115

二、火箭免疫电泳116

三、免疫固定电泳117

四、交叉免疫电泳118

第五节 免疫微粒技术119

一、胶乳凝集试验119

二、胶乳免疫测定法119

三、免疫磁性微粒分离与纯化技术120

第六节 免疫荧光技术120

第七节 放射免疫技术124

第八节 免疫酶技术126

一、酶标抗体制备技术127

二、酶联免疫吸附试验131

三、斑点酶联免疫吸附试验133

四、斑点酶免疫渗滤试验134

五、酶联免疫印迹技术135

第九节 生物素-亲和素标记技术140

一、生物素标记技术140

二、亲和素标记技术143

第十节 免疫金技术145

一、胶体金制备技术145

二、胶体金标记技术148

三、斑点免疫金银染色149

四、斑点金免疫渗滤测定法150

第十一节 免疫层析测定技术151

第四章 生物化学试验技术153

第一节 碳水化合物的代谢试验153

一、糖（醇、苷）类发酵试验153

二、葡萄糖代谢类型鉴别试验154

三、甲基红（MR）试验154

四、β-半乳糖苷酶试验（ONPG试验）155

五、V.P．试验155

六、胆汁七叶苷水解试验155

七、淀粉水解试验156

八、甘油复红试验156

九、葡萄糖酸氧化试验156

第二节 氨基酸和蛋白质的代谢试验157

一、硫化氢试验157

二、明胶液化试验157

三、吲哚试验（靛基质试验）157

四、苯丙氨酸脱氨酶试验158

五、氨基酸脱羧酶试验158

六、精氨酸双水解酶试验158

七、尿素酶试验158

八、霍乱红试验159

第三节 碳源和氮源利用试验159

一、枸橼酸盐利用试验159

二、丙二酸盐利用试验159

三、醋酸钠利用试验160

四、马尿酸钠水解试验160

五、乙酰胺利用试验160

第四节 酶类试验160

一、氧化酶试验160

二、触酶试验161

三、凝固酶试验161

四、DNA酶试验162

五、胆汁溶菌试验162

六、硝酸盐还原试验163

七、卵磷脂酶试验163

八、磷酸酶试验164

九、脂酶试验164

十、CAMP试验164

十一、石蕊牛乳试验165

第五节 抑菌试验165

一、Optochin敏感试验165

二、杆菌肽敏感试验165

三、新生霉素敏感试验166

四、O/129试验166

五、氰化钾试验166

第六节 其它试验166

一、克氏双糖铁或三糖铁琼脂培养基试验166

二、氢氧化钾拉丝试验167

第五章 分子生物学检测技术168

第一节 聚合酶链反应（PCR）技术168

一、PCR技术概述168

二、PCR反应模板的制备176

三、常规PCR技术178

四、套式PCR技术181

五、实时定量PCR（Real time PCR）技术182

六、免疫PCR技术186

七、聚合酶链反应-单链构象多态性分析190

八、其它扩增技术193

第二节 核酸分子杂交技术195

一、核酸分子杂交技术概述195

二、探针的种类及其选择197

三、核酸探针标记198

四、探针与靶核酸的杂交200

五、Southern杂交201

六、Northern印迹杂交207

七、斑点及狭缝印迹杂交211

八、核酸原位杂交213

九、核酸液相杂交技术218

十、杂交反应的条件及参数的优化220

十一、核酸探针杂交新技术221

十二、病原体的基因诊断（核酸探针杂交技术）223

第三节 生物芯片检测技术226

一、分类227

二、制备228

三、分子杂交229

四、杂交图谱的检测和分析229

五、检测设备229

六、生物芯片的应用230

第四节 细菌质粒指纹图谱分析233

参考文献238