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第一篇　常用生物化学实验技术及原理第一章　层析技术2

第二章　电泳技术11

第三章　光谱技术23

第四章　离心技术36

第五章　膜技术及其在生物化学中的应用42

第六章　蛋白质的分离纯化和检测46

第七章　蛋白质的分析技术54

第八章　临床生物化学检验64

第二篇　学生实验80

第九章　糖类的化学80

实验一　糖类的性质实验（一）——糖类的颜色反应80

Ⅰ．α-萘酚反应（Molisch反应）80

Ⅱ．间苯二酚反应（Seliwanoff反应）81

实验二　糖类的性质实验（二）——糖类的还原作用82

实验三 总糖的测定——蒽酮比色法84

实验四　还原糖的测定——3,5-二硝基水杨酸比色法86

实验五　血糖的定量测定——GOD-PAP法88

第十章　脂质的化学92

实验六 粗脂肪的提取和定量测定92

实验七　脂肪碘值的测定93

实验八　血清胆固醇的测定96

Ⅰ．化学比色法——磷硫铁法96

Ⅱ．化学比色法——邻苯二甲醛法98

Ⅲ．酶法99

第十一章　蛋白质的化学102

实验九 总氮量的测定——凯氏（Micro-Kjeldahl）定氮法102

实验十　氨基酸的分离鉴定——纸层析法105

实验十一 蛋白质的性质实验（一）——蛋白质及氨基酸的呈色反应107

Ⅰ．双缩脲反应107

Ⅱ．茚三酮反应109

Ⅲ．黄色反应110

Ⅳ．考马斯亮蓝反应112

实验十二 蛋白质的性质实验（二）——蛋白质等电点的测定和蛋白质的沉淀反应113

Ⅰ．蛋白质等电点的测定113

Ⅱ．蛋白质的沉淀与变性115

Ⅲ．尿蛋白定性检验118

实验十三　蛋白质相对分子质量的测定（一）——SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳120

实验十四 蛋白质相对分子质量的测定（二）——凝胶过滤法125

实验十五 蛋白质浓度的测定129

Ⅰ．考马斯亮蓝G-250法（Bradford法）测定蛋白质的浓度129

Ⅱ．用福林-酚试剂法（Lowry法）测定蛋白质的浓度131

实验十六　酪蛋白的制备133

第十二章　核酸的化学135

实验十七 大肠杆菌质粒DNA的提取、酶切和琼脂糖凝胶电泳鉴定135

实验十八 肝细胞核中核酸（RNA和DNA）的分离与测定138

实验十九 薄层层析法分离AMP、ADP和ATP140

实验二十 紫外分光光度法测定核酸含量142

实验二十一 应用PCR技术扩增DNA分子144

第十三章　酶和维生素147

实验二十二　酶的特性147

Ⅰ．温度对酶活力的影响147

Ⅱ．pH对酶活力的影响148

Ⅲ．唾液淀粉酶的活化和抑制150

Ⅳ．酶的专一性151

实验二十三　枯草杆菌蛋白酶活力测定154

实验二十四 底物浓度对酶促反应速率的影响——米氏常数的测定156

实验二十五　胰凝乳蛋白酶的制备及活力测定160

实验二十六 维生素C的定量测定165

Ⅰ．2,4-二硝基苯肼法165

Ⅱ．荧光法168

实验二十七 维生素A的定量测定170

Ⅰ．三氯化锑法170

Ⅱ．紫外分光光度法173

第十四章　新陈代谢176

实验二十八 肌糖原的酵解作用176

实验二十九 小麦萌发前后淀粉酶活力的比较178

实验三十　发酵过程中无机磷的利用180

实验三十一　脂肪酸的β-氧化183

实验三十二 血液中转氨酶活力的测定185

实验三十三　组织中乳酸脱氢酶同工酶的活性染色187

第十五章　综合实验191

实验三十四 碱性磷酸酶的分离纯化及其特性研究191

Ⅰ．碱性磷酸酶的分离纯化及各级分酶活性和蛋白含量的测定191

Ⅱ．碱性磷酸酶的纯度、蛋白印迹鉴定及其亚基相对分子质量测定196

Ⅲ．碱性磷酸酶的酶学特性研究200

实验三十五　溶菌酶的提取和系列性质测定207

Ⅰ．溶菌酶的分离纯化208

Ⅱ．溶菌酶分离纯化参数的测定209

Ⅲ．SDS-PAGE鉴定纯化产物的纯度和测定溶菌酶的相对分子质量212

Ⅳ．溶菌酶的酶学特性研究214

Ⅴ．分子筛层析测酶相对分子质量216

附录219

一、实验室基本操作219

二、试剂的配制及其分级227

三、实验误差的统计学处理229

四、硫酸铵饱和度计算表232

五、常用核酸、蛋白质换算数据233

六、氨基酸符号及相应密码子234

七、常见酸碱试剂的浓度及密度235

八、常用缓冲液的配制236

九、常用酸碱指示剂243

十、离心机转速与相对离心力的换算244

十一、层析中常用介质的规格及性能246

参考文献250