图书介绍

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基因工程实验指南
  • 李玮瑜,李姗,张洪映主编 著
  • 出版社: 北京:中国农业科学技术出版社
  • ISBN:9787511629722
  • 出版时间:2017
  • 标注页数:211页
  • 文件大小:31MB
  • 文件页数:220页
  • 主题词:基因工程-实验-高等学校-教材

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图书目录

第一章 仪器设备1

分子生物学实验室常用仪器设备简介1

第二章 核酸9

第一节 核酸的构成9

第二节 基因组DNA的提取14

第三节 TENS法提取微生物基因组DNA18

第四节 DNA的扩增19

第五节 DNA片段的琼脂糖凝胶电泳和回收纯化21

第六节 DNA重组及鉴定28

第七节 核酸分子杂交技术31

第八节 Southern blotting技术41

第九节 植物总RNA的提取和检测48

第十节 poly(A)+RNA的提取51

第十一节 无菌感染期线虫RNA的提取51

第十二节 果蝇总RNA的提取53

第十三节 哺乳动物RNA的提取54

第十四节 反转录RNA55

第十五节 半定量PCR技术56

第十六节 实时荧光定量PCR技术57

第十七节 Northern bloting技术59

第十八节 核酸染色61

第十九节 双脱氧链终止法测序技术64

第二十节 焦磷酸测序(Pyrosequencing)66

第二十一节 核酸信息分析68

第三章 蛋白质80

第一节 定量蛋白质组学84

第二节 植物蛋白的提取85

第三节 动物蛋白质的提取88

第四节 动物细胞器蛋白的提取89

第五节 细菌蛋白质的提取93

第六节 原核表达94

第七节 用IPTG诱导大肠杆菌表达重组绿色荧光蛋白98

第八节 蛋白质的定量99

第九节 聚丙烯酰胺变性凝胶电泳104

第十节 非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳108

第十一节 双向凝胶电泳110

第十二节 Western bolting技术114

第十三节 蛋白质转印实验半干式116

第十四节 蛋白质转印实验电泳液式118

第十五节 蛋白质染色119

第十六节 染色质免疫沉淀技术(ChIP)121

第十七节 凝胶迁移实验(EMSA)125

第十八节 超迁移EMSA(Super-Shift EMSA)129

第十九节 蛋白质序列分析131

第四章 载体构建及扩繁132

第一节 DNA限制性内切酶酶切分析132

第二节 PCR产物连接135

第三节 连接产物的转化136

第四节 挑菌与摇菌140

第五节 保菌141

第六节 菌液PCR检测141

第七节 质粒提取142

第八节 质粒DNA的电泳检测145

第九节 ABI3730XL测序实验程序146

第十节 感受态细胞的制备151

第十一节 农杆菌转化法152

第十二节 基于毛细管电泳的荧光检测SSR实验程序153

第五章 蛋白质—蛋白质相互作用156

第一节 目标蛋白的亚细胞定位156

第二节 酵母双杂交160

第三节 酵母文库的筛选164

第四节 免疫共沉淀165

第五节 GST融合蛋白进行Pulldow实验168

第六节 双分子荧光互补(BiFC)169

第七节 荧光共振能量转移[Fluorescence resonance energy transfer(FRET)]175

第八节 Far Western blotting印迹法176

第九节 酵母单杂交实验179

第十节 原生质体提取及转化步骤180

第六章 作物转化183

第一节 浸蘸法转化拟南芥185

第二节 农杆菌侵染法转化烟草187

第三节 烟草瞬时表达190

第四节 农杆菌侵染法水稻191

第五节 生理指标的测定193

第七章 常用试剂的配制197

第一节 抗生素溶液的配制197

第二节 常用缓冲液的配制198

第三节 常用培养基的配制207

参考文献211

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