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第一章 糖类1

实验1 糖的颜色反应1

实验1.1 莫氏实验1

实验1.2塞氏实验2

实验1.3杜氏实验3

实验2 糖的还原作用4

实验3 血糖的定量测定（Folin-Wu法）5

实验4 血糖的定量测定（Folin-Malmros法）7

实验5 血糖的定量测定（葡萄糖氧化酶法）9

实验6 血液中葡萄糖的测定（邻甲苯胺法）11

实验7 葡萄糖含量测定（苯酚法）13

实验8 蒽酮比色定糖法14

实验9 植物组织中可溶性总糖的测定（蒽酮比色法）16

实验10 总糖和还原糖的测定（3,5-二硝基水杨酸法）18

实验11 多糖的实验20

实验12 果胶的提取与果胶含量的测定21

实验13 肝素钠的定量测定24

实验14 糖的旋光性和变旋现象26

第二章 脂质28

实验15 脂肪的组成28

实验16 卵磷脂的提取和鉴定30

实验17 粗脂肪含量的测定（Soxhlet抽提法）30

实验18 碘价的测定（Hanus法）33

实验19 皂化价的测定35

实验20 脂肪酸价的测定37

实验21 脂肪乙酰价的测定38

实验22 血清胆固醇的定量测定（磷硫铁法）39

实验23 血清总胆固醇的测定（邻苯二甲醛法）41

实验24 血清胆固醇的定量测定（醋酸酐法）42

实验25 血清甘油三酯简易测定法44

实验26 血清甘油三酯的测定（GPO-PAP法）46

实验27 丙二醛（MDA）的测定48

第三章 蛋白质51

实验28 蛋白质的颜色反应51

实验29 蛋白质的沉淀反应54

实验30 蛋白质浓度测定（微量凯氏定氮法）55

实验31 蛋白质浓度测定（双缩脲法）58

实验32 蛋白质浓度测定（Folin-酚试剂法）60

实验33 蛋白质浓度测定（紫外光吸收法）61

实验34 蛋白质浓度测定（考马斯亮蓝结合法）63

实验35 非蛋白氮（NPN）的测定64

实验36 甲醛滴定法66

实验37 DNP-氨基酸的制备和鉴定68

实验38 DNS-氨基酸的制备和鉴定71

实验39 用DNS法鉴定蛋白质或多肽的N-端氨基酸73

实验40 用DNS法测定多肽的氨基酸组成76

实验41 肽的序列分析（PTH法）77

实验42 甲硫氨酰甘氨酸二肽的合成80

实验43 尿素对蛋白质的变性作用82

实验44 氨基酸纸层析法84

实验45 氨基酸微晶纤维素薄板层析法87

实验46 离子交换柱层析法分离氨基酸88

实验47 血清白蛋白的分离与纯化90

实验48 凝胶层析法分离纯化蛋白质93

实验49 DEAE-Sephadex A-25分离纯化多肽95

实验50 亲和层析法分离纯化单克隆抗体97

实验51 醋酸纤维薄膜电泳法分离血清蛋白质98

实验52 血清糖蛋白醋酸纤维薄膜电泳101

实验53 牛乳中酪蛋白和乳糖的制备与鉴定103

实验54 聚丙烯酰胺凝胶圆盘电泳法分离血清蛋白质105

实验55 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定胰岛素108

实验56 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定蛋白质的相对分子质量110

实验57 用等电聚焦电泳法测定蛋白质等电点114

实验58 对流免疫电泳法测定胎儿甲种蛋白质116

实验59 火箭免疫电泳法118

实验60 Western印迹119

实验61 酶联免疫吸附测定（ELISA）121

第四章 核酸124

实验62 核酸的定量测定（定磷法）124

实验63 酵母RNA的提取126

实验64 RNA的定量测定（苔黑酚法）127

实验65 动物肝脏中DNA的提取129

实验66 DNA的定量测定（二苯胺法）130

实验67 5′-核苷酸的定量测定（过碘酸氧化法）132

实验68 DEAE-纤维素薄板层析法测定核苷酸134

实验69 腺苷三磷酸的定量测定（纸电泳法）136

实验70 核酸的酶法降解以及葡聚糖凝胶层析法制备5′-单核苷酸138

实验71 质粒DNA的提取139

实验72 DNA琼脂糖凝胶电泳141

第五章 酶144

实验73 影响酶促反应的因素——温度、pH、激活剂及抑制剂144

实验74 胰蛋白酶米氏常数的测定147

实验75 胆碱酯酶米氏常数的测定150

实验76 过氧化氢酶米氏常数的测定152

实验77 用正交法测定几种因素对酶活力的影响153

实验78 胰蛋白酶抑制剂苯甲基磺酰氯对胰蛋白酶的抑制作用156

实验79 溶菌酶的提纯结晶和活力测定159

实验80 猪胰糜蛋白酶的制备和纯度鉴定161

实验81 大肠杆菌碱性磷酸酶的制备163

实验82 碱性磷酸酶的提取和分离及比活力测定166

实验83 琼脂糖凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶170

实验84 聚丙烯酰胺凝胶电泳法分离乳酸脱氢酶同工酶172

实验85 肝脏谷丙转氨酶活力测定174

实验86 血清谷丙转氨酶活力测定177

实验87 固定化5′-磷酸二酯酶的制备及其在分离核苷酸中的应用178

第六章 维生素184

实验88 维生素A的定性测定184

实验89 维生素B1的定性测定185

实验90 维生素C的定量测定（2,6-二氯酚靛酚滴定法）186

实验91 维生素C的定量测定（磷钼酸法）188

实验92 核黄素（维生素B2）荧光光度定量测定法190

实验93 胡萝卜素的定量测定192

实验94 荧光法测定核黄素结合蛋白-核黄素的解离常数194

第七章 激素197

实验95 尿中17-羟皮质类固醇的测定（Porter-Silber法）197

第八章 物质代谢与生物氧化200

实验96 肌糖原的酵解作用200

实验97 脂肪酸的β-氧化202

实验98 华氏（Warburg）呼吸仪瓶常数的测定204

实验99 L-谷氨酸的酶促脱羧作用（测压法测定L-谷氨酸）206

实验100 发酵过程中无机磷的被利用和ATP的生成（ATP的生物合成）208

第九章 综合实验211

实验101 用高效液相层析（HPLC）定量测定胰岛素中的氨基酸211

实验101.1 胰岛素的酸水解211

实验101.2 用HPLC定量测定胰岛素水解产物中的氨基酸212

实验102 维生素C对过氧化氢（H2O2）诱导的小鼠巨噬细胞氧化损伤的保护作用214

实验102.1 小鼠腹腔巨噬细胞的收集与培养214

实验102.2 MTT法测定巨噬细胞死亡率216

实验102.3 活性氧检测试剂盒探测细胞内活性氧的水平217

实验102.4 NO和NO合成酶活性的测定219

实验103 酵母醇脱氢酶的提纯及其性质的研究220

实验103.1 酵母醇脱氢酶的提纯220

实验103.2 酵母醇脱氢酶的凝胶层析223

实验103.3 酵母醇脱氢酶的专一性224

实验103.4 酵母醇脱氢酶的动力学研究226

实验104 α-淀粉酶的分离纯化、鉴定和Km、Vmax的测定231

实验104.1 α-淀粉酶的活力测定232

实验104.2 α-淀粉酶的疏水层析234

实验104.3 α-淀粉酶的离子交换柱层析236

实验104.4 聚丙烯酰胺凝胶垂直平板电泳法鉴定α-淀粉酶238

实验104.5 米氏常数（Km）和最大反应速度（Vmax）的测定240

实验105 螺旋藻藻蓝蛋白的分离、纯化与鉴定242

实验105.1 螺旋藻粗藻蓝蛋白的制备242

实验105.2 离子交换柱层析法分离藻蓝蛋白243

实验106 原花色素的提取、纯化与测定244

实验106.1 山楂原花色素的提取245

实验106.2 原花色素的测定（Ⅰ）246

实验106.3 原花色素的测定（Ⅱ）248

实验107 熊果酸的制备和测定249

实验107.1 山楂熊果酸的制备249

实验107.2 熊果酸含量测定250

实验108 镍化合物诱导人Jurkat细胞凋亡途径的研究252

实验108.1 Jurkat细胞的培养252

实验108.2 Annexin V-FITC/P1双染法检测细胞凋亡253

实验108.3 RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2的表达255

实验108.4 酶联免疫吸附检测Bcl-2蛋白表达水平257

第十章 临床生化指标的自动测定（见科学出版社教学服务网站）260

附录261

一、生物化学实验须知261

二、玻璃仪器的洗涤及一些常用的洗涤剂262

三、移液器的使用263

四、吸管的使用265

五、过滤和离心265

六、930型荧光光度计的使用266

七、UV2600紫外可见分光光度计的使用268

八、自动生化分析仪（见科学出版社教学服务网站）271

九、全自动免疫分析仪TOSOH AIA 2000标准化操作规程（见科学出版社教学服务网站）271

十、血红蛋白检测仪Bio-Rad D-10标准化操作规程（见科学出版社教学服务网站）271

十一、实验室常用酸碱的相对密度和浓度271

十二、常用酸碱指示剂271

十三、缓冲液的配制272

十四、恒沸盐酸的制备278

十五、大肠杆菌丙酮粉的制备278

十六、生物化学中某些重要化合物的Mr及pK值279

十七、氨基酸的一些物理常数281

十八、某些蛋白质的物理性质283

十九、化学元素的相对原子质量表284

二十、离心机转速（r/min）与相对离心力（RCF）的换算285

二十一、硫酸铵饱和度的常用表287

二十二、常用离子交换剂288

二十三、常用凝胶过滤层析介质291

二十四、汞的密度293