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细胞与分子生物学实验教程
  • 卢健主编 著
  • 出版社: 北京:人民卫生出版社
  • ISBN:9787117127509
  • 出版时间:2010
  • 标注页数:186页
  • 文件大小:61MB
  • 文件页数:195页
  • 主题词:细胞生物学-实验-医学院校-教材;分子生物学-实验-医学院校-教材

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图书目录

第一章 绪论1

第一节 概述1

第二节 课程设置与要求1

第三节 实验的基本要求2

一、实验室的要求2

二、实验课的要求2

三、实验记录的要求3

第四节 实验报告的撰写3

第二章 基础实验5

第一节 电泳技术5

实验一 血清蛋白醋酸纤维薄膜电泳14

实验二 聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳分离蛋白质16

实验三 血清脂蛋白琼脂糖电泳19

实验四 免疫电泳与对流免疫电泳20

第二节 层析技术23

实验五 凝胶柱层析分离鉴定蛋白质30

实验六 DNS-氨基酸的双向聚酰胺薄膜层析32

实验七 离子交换层析分离氨基酸35

第三节 离心技术37

实验八 差速离心法从鼠肝中提取核糖核蛋白体和核蛋白体RNA43

一、提取核糖核蛋白体43

二、提取核蛋白体RNA44

实验九 蔗糖梯度离心法分步离心核糖核酸44

实验十 小鼠脾单个核细胞的分离——密度梯度离心法45

第四节 蛋白质技术47

实验十一 血清免疫球蛋白的分离、纯化与定量49

实验十二 细胞总蛋白的提取50

实验十三 蛋白质定量测定方法——标准曲线法测定蛋白质含量52

实验十四 Western印迹法检测表达蛋白55

第五节 多聚酶链体外扩增技术(PCR)58

实验十五 聚合酶链反应(PCR)59

一、PCR技术检测β-actin基因59

二、琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段61

实验十六 逆转录PCR64

一、Trizol法抽提总RNA65

二、逆转录(RT)-PCR67

实验十七 PCR单链构象多态性分析(示教)68

第六节 免疫技术71

实验十八 直接凝集试验——血型鉴定实验(玻片法)72

实验十九 双向免疫扩散实验74

实验二十 酶联免疫吸附实验(ELISA)——双抗体夹心法75

实验二十一 细胞膜表面抗原检测——补体依赖的微量淋巴细胞毒实验77

第七节 细胞分析技术80

实验二十二 显微镜使用、细胞的基本形态与结构及细胞的化学成分分析80

一、光学显微镜的使用方法80

二、过氧化氢酶分解过氧化氢实验81

三、蟾蜍血细胞内DNA的显示82

四、几种特殊显微镜的基本原理和用途82

实验二十三 动物原代细胞的培养84

实验二十四 培养细胞的存活率检测86

实验二十五 蟾蜍血细胞的体外融合87

实验二十六 细胞有丝分裂及细胞骨架的显微观察91

实验二十七 动物染色体的制备92

第八节 染色体分析技术93

实验二十八 外周血培养染色体制备技术93

实验二十九 染色体标本G显带制备96

实验三十 染色体C显带技术98

实验三十一 人类染色体非显带核型分析99

实验三十二 人类染色体G显带核型分析100

第三章 其他基本实验技术101

实验一 葡萄糖定量方法——标准管法测定葡萄糖含量101

实验二 流式细胞术(示教)102

实验三 图像分析/电镜观察(示教)105

一、图像分析105

二、电子显微镜观察107

第四章 综合实验109

实验一 基因组DNA分析109

一、高分子量DNA的提取与纯化109

二、DNA的酶解114

三、琼脂糖凝胶电泳分离DNA片段115

四、DNA转移116

五、探针标记118

六、核酸分子杂交120

实验二 兔肝碱性磷酸酶(AKP)的纯化及Km的测定123

一、有机溶剂法部分纯化兔肝AKP123

二、AKP比活性测定127

三、DEAE纤维素(DE-52)离子交换层析进一步纯化AKP129

四、AKP Km测定133

五、结果135

实验三 细胞凋亡检测135

一、细胞凋亡诱导136

二、琼脂糖凝胶检测凋亡细胞DNA ladder138

三、TUNEL法检测凋亡细胞140

实验四 临床标本处理、核酸、蛋白质表达和染色体定位143

一、常见组织细胞的培养方法143

二、肿瘤细胞的培养方法147

三、细胞的冻存、解冻和计数方法150

四、细胞与组织核酸的非放射性标记原位杂交检测技术152

五、免疫细胞和组织异常蛋白表达的检测158

六、基因的染色体定位163

七、FISH技术与检测169

第五章 设计性实验引导173

第一节 设计性实验概述173

第二节 设计性实验174

实验一 选一种miRNA研究其与临床的关系174

实验二 肿瘤细胞或组织相关细胞因子检测分析实验设计175

实验三 培养环境中的葡萄糖浓度对细胞的影响175

实验四 人体肿瘤小鼠移植瘤的建立和实验176

实验五 糖代谢与肿瘤诊断和治疗176

实验六 中药提取物对人类疾病的治疗作用177

实验七 免疫细胞亚群分离与鉴定178

实验八 细胞因子的测定178

实验九 外环境对免疫功能影响的实验设计179

实验十 免疫学快速检测方法的实验设计180

实验十一 三体综合征的产前诊断方法181

实验十二 镰形红细胞贫血的诊断方法181

附录183

附录一 实验误差及其产生原因与纠正183

附录二 实验室注意事项及应急处理185

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