图书介绍
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- 李立家，肖庚富编著 著
- 出版社： 北京：科学出版社
- ISBN：7030129253
- 出版时间：2004
- 标注页数：208页
- 文件大小：19MB
- 文件页数：218页
- 主题词：基因－遗传工程－高等学校－教材
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图书目录
目 录1
1基因工程概述1
1.1基因工程的发展简史1
1.1.1什么是基因工程1
1.1.2基因工程的开端1
1.1.3基因工程的发展2
1.2基因工程的研究意义和应用3
1.2.1基因工程在工业领域的应用3
1.2.2基因工程在农业领域的应用5
1.2.3基因工程在医药领域的应用7
1.3结语8
1.4基因工程课程与其他课程之间的关系8
2基因工程的载体和工具酶9
2.1载体9
2.1.1质粒载体9
2.1.2噬菌体载体17
2.1.3其他载体24
2.2工具酶25
2.2.1限制性内切核酸酶25
2.2.2 DNA聚合酶和Klenow大片段酶29
2.2.3DNA连接酶30
2.2.4碱性磷酸酶31
2.2.5末端脱氧核苷酸转移酶31
3基因工程的常规技术32
3.1凝胶电泳技术32
3.1.1琼脂糖凝胶电泳的原理32
3.1.2琼脂糖凝胶电泳的影响因素33
3.2杂交技术34
3.2.1探针与探针标记34
3.2.2 Southern杂交35
3.3 PCR技术36
3.2.5菌落（噬菌斑）原位杂交36
3.2.4 Western杂交36
3.2.3 Northern杂交36
3.3.1 PCR技术的基本成分37
3.3.2 PCR技术的原理和过程40
3.3.3荧光定量PCR42
3.4生物芯片43
3.4.1基因芯片44
3.4.2蛋白芯片45
3.5基因文库构建46
3.5.1基因组文库构建46
3.5.2 cDNA文库的构建47
3.6酵母双杂交系统48
3.6.1酵母双杂交系统的基本原理48
3.6.2酵母双杂交系统的应用49
3.7 DNA测序50
3.6.3酵母双杂交系统存在的问题50
3.7.1 Sanger双脱氧链终止法51
3.7.2 Maxam-Gilbert化学修饰法51
4基因在大肠杆菌、酵母中的高效表达53
4.1基因的表达系统与表达策略53
4.1.1基因的表达系统53
4.1.2根据表达蛋白用途选择基因的表达策略54
4.2基因在大肠杆菌中的高效表达56
4.2.1基于T7噬菌体RNA聚合酶／启动子的大肠杆菌表达系统56
4.2.2蛋白质的融合表达60
4.2.3蛋白质的分泌型表达66
4.2.4蛋白质的包含体形式表达与蛋白质复性68
4.2.5重组大肠杆菌的高密度培养71
4.3基因在酵母中的高效表达74
4.3.1酵母表达系统概述74
4.3.2甲醇酵母表达系统75
4.3.3组织纤溶酶原激活剂在甲醇酵母中的表达80
5.1植物的转基因技术84
5.1.1植物细胞培养技术84
5转基因植物84
5.1.2植物转基因技术的基本路线85
5.1.3转基因的受体系统85
5.1.4外源基因导入植物的方法86
5.2转基因植物的筛选与检测93
5.2.1报告基因93
5.2.2分子生物学检测方法97
5.3改进转基因的技术98
5.3.1转基因植物中外源基因的沉默99
5.3.2提高外源基因表达水平的策略100
5.4农作物基因工程104
5.4.1抗虫转基因作物104
5.4.2抗病毒作物106
5.4.4抗除草剂转基因作物107
5.4.3抗细菌和真菌作物107
5.4.5抗非生物胁迫作物108
5.5生物反应器108
5.6转基因植物的安全性111
5.6.1标记基因的安全性111
5.6.2转基因植物的安全性评价和争论的问题112
6转基因动物117
6.1动物转基因技术117
6.1.1显微注射法118
6.1.2逆转录病毒法122
6.1.3胚胎干细胞法123
6.1.4精子载体法132
6.1.5体细胞核移植法134
6.1.6受体介导法135
6.2提高转基因效率的策略136
6.3.1转基因动物在基因功能等生命科学基础研究中的应用137
6.3转基因动物的应用137
6.3.2转基因技术在动物育种中的应用138
6.3.3转基因动物在医药科学研究中的应用139
6.4转基因动物研究存在的问题及展望144
7基因治疗146
7.1基因治疗的概念与发展146
7.1.1基因治疗的概念和策略146
7.1.2基因治疗的基本程序147
7.1.3基因治疗的现状与展望149
7.2基因治疗的载体150
7.2.1病毒载体151
7.2.2非病毒载体158
7.2.3载体与基因治疗中的靶向性问题160
7.3重要疾病的基因治疗163
7.3.1遗传病的基因治疗163
7.3.2肿瘤的基因治疗166
7.3.3病毒病的基因治疗172
8蛋白质工程180
8.1蛋白质工程的理论基础、诞生和发展180
8.1.1蛋白质工程的理论基础180
8.1.2蛋白质结构测定与结构预测184
8.1.3蛋白质工程的诞生和发展187
8.2蛋白质工程的关键技术188
8.2.1定点诱变189
8.2.2定向进化192
8.2.3其他技术（高变菌株、tRNA介导蛋白质工程）197
8.3蛋白质工程的应用及实例199
8.3.1定点突变与蛋白质药物工程：胰岛素199
8.3.2定点突变、定向进化与工业用酶：枯草杆菌蛋白酶等202
8.3.3结构域的拼接与金属硫蛋白工程204
8.3.4抗体工程206
主要参考文献208