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第一篇 核酸技术3

第一章 DNA提取和鉴定技术3

第一节 如何获得高产量DNA3

第二节 乙醇沉淀核酸中盐的作用5

第三节 核酸抽提中乙醇洗涤的作用8

第四节 DNA的聚丙烯酰胺凝胶电泳银染10

第五节 荧光素酶双报告基因中调节目的质粒与内参质粒比例是关键12

第二章 RNA提取技术16

第一节 如何提高RNA提取质量16

第二节 如何提高总RNA纯度和产量17

第三节 RNA纯度对荧光定量RT-PCR准确性的影响18

第四节 组织反复冻融易致RNA降解20

第五节 谁动了我的细胞RNA21

第三章 质粒提取和构建技术24

第一节 质粒DNA提取实验的细节深究24

第二节 质粒DNA电泳有几条带26

第三节 质粒构建28

第四节 灵活酶切以玩转克隆29

第五节 分子克隆方法——细节决定成功32

第四章 PCR技术35

第一节 以V2R为例设计引物并使用BLAST验证35

第二节 引物设计惑与获43

第三节 引物二聚体终于消失了47

第四节 PCR扩增实验污染的惨痛教训48

第五节 如何减少PCR产物中的引物二聚体50

第六节 昙花一现的PCR结果52

第七节 如何获得完美的荧光定量PCR结果54

第八节 实时荧光定量PCR中荧光定量标准曲线很重要56

第九节 MicroRNA的荧光定量PCR检测之我见59

第十节 残缺的芯片扫描图61

第十一节 “假阳鬼子”和“拦路虎”64

第十二节 PCR扩增攻略67

第二篇 蛋白质技术71

第一章 蛋白质电泳技术71

第一节 讨厌的波浪线71

第二节 冬天里的一把火73

第三节 当头棒喝！蛋白质双向凝胶电泳聚不上焦75

第四节 蛋白质双向凝胶电泳横条纹的教训76

第五节 蛋白质双向凝胶电泳聚焦后胶条的白色霜状析出78

第六节 蛋白质双向凝胶电泳弥散的蛋白质点79

第七节 Clean up失效后的思考80

第二章 Western blotting方法83

第一节 Western-blotting变成了Western-lost83

第二节 高背景被“擦”掉了84

第三节 “祸起萧墙”——豁然开朗86

第四节 蛋白条带不给力88

第五节 蛋白抗体不给力90

第六节 蛋白抑制剂不给力92

第七节 令人费神的磷酸化蛋白的WB检测93

第八节 如何使样品间内参趋于一致95

第九节 为了那比金子更贵的抗体97

第十节 Western Blotting——多个环节需注意99

第三章 蛋白质免疫鉴定技术106

第一节 都是封闭血清惹的祸106

第二节 免疫荧光实验技术之我见109

第三节 免疫共沉淀实验的独门秘籍——精选“手术刀”去除免疫球蛋白条带111

第四章 蛋白质纯化和蛋白质晶体技术113

第一节 试剂说明书不是“金标准”113

第二节 沉淀、沉淀，不要再见115

第三节 拨开乌云见天日——从蛋白质微晶到晶体118

第三篇 细胞技术123

第一章 细胞培养的基本技术123

第一节 特别的爱给特别的你123

第二节 谁动了我的细胞125

第三节 如何成功进行大鼠肺动脉平滑肌细胞的体外培养126

第二章 细胞污染130

第一节 什么污染130

第二节 恼人的小黑点132

第三节 谁是细胞污染的元凶134

第四节 黑胶虫，请别来找我135

第三章 细胞活力检测138

第一节 “鱼”和“熊掌”不可兼得138

第二节 走自己的路，莫轻易盲从140

第三节 MTT结晶溶解很重要142

第四节 不断探索，寻找最佳实验条件144

第四章 细胞凋亡检测146

第一节 DAPI染核中细胞固定的重要性146

第二节 避免非特异染色148

第三节 胰酶消化制备单细胞悬液149

第五章 流式细胞术152

第一节 是谁悄悄蒙上了你的眼睛152

第二节 动态观察，多思多得154

第三节 都是染料惹的祸156

第六章 相关技术159

第一节 “厚此”≠“薄彼”159

第二节 向左转？向右转？160

第三节 染色体制备心得162

第四节 为什么单个核细胞分离得率不高163

第五节 如何采用CPT管成功地分离外周血单个核细胞165

第四篇 微生物与免疫技术170

第一章 微生物技术170

第一节 众里寻他千百度——厌氧菌的培养经历171

第二节 脂多糖银染的技巧172

第三节 关于重复实验的几点看法174

第四节 搅拌转速对发酵生产的影响175

第五节 都是更换生产品种惹的祸178

第六节 发酵罐染菌的原因分析179

第七节 快速准确知晓靛基质试验结果的巧方法183

第八节 变形杆菌属与其他菌属的分离方法185

第二章 免疫技术187

第一节 成功中的失败190

第二节 阳性对照也很重要192

第三节 酶标板今天“唱白脸”194

第四节 不要被OD值的大小所迷惑——关于ELISA法检测梅毒假阳性与假阴性的报道196

第五节 “即刻法”的前两点197

第六节 加样仪惹的祸199

第七节 “鱼”与“熊掌”兼得的梅毒检测方法201

第八节 人兔和谐，共用抗体202

第九节 我的兔子谁做主204

第十节 当空白对照不再空白206

第十一节 自噬体的检测方法207

第五篇 动物技术211

第一章 纲举目张——建模心得211

第一节 实验动物模型选择211

第二节 发育损伤模型屡遭失败后的原因探讨212

第三节 兔VX2肿瘤模型构建方法改进214

第四节 等长收缩时的力量与持续时间问题216

第五节 可控水囊的妙用218

第六节 急性胰腺炎造模方式的选择220

第七节 颌关节定量加力模型的建立始末226

第八节 大鼠脑立体放射治疗模型制作228

第九节 大鼠放射性肺炎模型的制作231

第十节 小鼠肿瘤放疗模型的制作235

第十一节 放射性食管损伤模型制作238

第十二节 痉挛模型中“撞”来的成功240

第十三节 移植排斥需谨慎243

第二章 未雨绸缪——实验准备245

第一节 动物实验前的准备245

第二节 纪念降脂实验中牺牲的大鼠兄弟们246

第三节 溶血与凝聚实验中血的代价248

第四节 吸入染毒装置的改良249

第五节 与猫配合的降压实验251

第六节 如何进行裸鼠移植瘤的无菌照射252

第三章 画龙点睛——实验技巧256

第一节 柳暗花明又一村——中药体内实验感悟256

第二节 可怕的过敏实验257

第三节 祛痰实验方法的改进258

第四节 如此方便的静脉给药途径260

第五节 大动物实验生命体征监测及相应处理的重要性261

第六节 小鼠长期多次采血经验荟萃263

第七节 浅谈“非标准状态”下大鼠脑定位技巧265

第八节 拨出肠管与否对肝切除术后大鼠生存时间的影响267

第九节 脑立体定位中轻松插耳杆269

第十节 九月份的尾巴是天秤座271

第四章 知己知彼——动物习性273

第一节 剖析行为学实验中容易忽略的细节273

第二节 你熟悉实验动物的生活习性了吗？275

第三节 向清醒状态下的大鼠脑内给药方法探讨278

第六篇 临床检验技术283

第一章 临床血液学与临床基础检验技术283

第一节 CA500血凝仪遭遇神奇“不凝门”283

第二节 LH750血液细胞分析仪异常白细胞分类284

第三节 全自动血液分析仪血小板计数误差及处理286

第四节 血沉仪使用问题的分析288

第五节 血液细胞分析仪白细胞不能分类的祸首是棉絮290

第六节 血小板检测的思考291

第七节 温度导致血常规结果出现问题292

第八节 纤维蛋白原时序性减少的原因分析293

第九节 什么导致纤维蛋白原检测结果都偏低295

第十节 难以对付的疟原虫厚片染色技术296

第十一节 脑脊液沉渣涂片制作巧方法297

第十二节 染出满意的血涂片的一点心得298

第十三节 前列腺液取不出怎么办299

第十四节 巧用尿试纸节省试剂成本300

第十五节 高血压三项特殊真空管的制作301

第十六节 人精子染色体制备技术302

第十七节 如何使用分离胶管制备高质量血清标本304

第二章 临床输血检验技术306

第一节 肝素抗凝血导致交叉配血不合306

第二节 反定型U型板法的惑与获307

第三节 O型夫妇为何生出B型儿子？309

第四节 交叉配血相合为什么不能发血？310

第五节 新配的2-巯基乙醇失效了吗？311

第六节 找到致病抗体为何不能发阳性确认报告？313

第七节 是阴性？弱D？还是阳性？314

第三章 临床生物化学与分子生物学检验技术316

第一节 镁离子结果怎么不美了？316

第二节 谁对血清镁的结果施了魔法？317

第三节 前后的“我”为何不一样319

第四节 无机磷异常升高的原因——关于全自动生化仪交叉污染的发现和处理320

第五节 血清磷测定结果假性升高原因分析及解决办法321

第六节 住院患者怎么都缺钙了？323

第七节 HITACHI7180全自动生化分析仪杯空白报警的惑与获325

第八节 UPS电源对生化仪电解质模块的影响328

第九节 “回收实验”在样本结果复查中的妙用329

第十节 莫名其妙的血钾升高血糖降低——不严格执行SOP记录的教训330

第十一节 前清蛋白，你为什么总会出现负值？332

第十二节 谁偷走了他们的前白蛋白334

第十三节 透过“乳糜”测本质336

第十四节 标本存放数天后葡萄糖含量不降反升338

第十五节 一份标本，两个医院，结果相差近20倍！339

第十六节 风扇的巧妙用处——如何发挥老仪器的余热340

第十七节 强生生化350的一个秘密341

第十八节 AVL血气分析仪提高试剂使用效率方法探讨342

第十九节 ALT与AST分道扬镳谁的错343

第二十节 什么让清洗管内堵满了绿色浮云？——关于生化仪清洗管堵塞原因探究和排除的报道345

第四章 临床免疫学检验技术347

第一节 厂家给的参数就正确吗？347

第二节 离奇的“张冠李戴”——关于BN-Ⅱ特定蛋白仪发生结果异常的报道348

第三节 失灵的“金标准”350

第四节 铁蛋白检测结果异常的分析351

第五节 为什么消化道出血的患者粪便隐血结果却为阴性？352

第六节 质控正常结果可靠吗？353

第七节 同样做校准，结果却不同354

第七篇 海外实验室技术358

Section1．Brain slice358

Section2．Array-comparative genomic hybridization(array CGH)363

Section3．Confocal Microscopy for Live Cell Imaging367

Section4．Coronary Artery Ligation on Mice376

Section5．Decerebration in Rodents381

Section6．In-situ Carotid Sinus Nerve Electrophysiological Recordings384

Section7．Extracellular Single-unit Recording in vivo390

Section8．Fluorescence in-situ Hybridization on Formalin-fixed，Paraffin-embedded Tissue Sections395

Section9．Isolation and Culture of Alveolar Macrophage and PeritonealMast Cell398

Section10．Acute Renal Nerve Activity Recording on an Anesthetized Rat403

Section11．Renal Blood Flow Recording in an Acute Anesthetized Preparation406

Section12．Chromatin Immunoprecipitation411

Section13．PCR/RT-PCR/Q-PCR414

Section14．Single-Fiber Recording of Skeletal Muscle Afferents419

Section15．Co-Immunoprecipitation and Western Blotting Techniques426