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第一章　植物保护与生物技术1

第一节　植物保护学科的发现与生命科学的进步1

第二节　植物保护学科的发现与生物技术的进步10

一、对转基因育种的推动作用10

二、对植物细胞工程的推动作用12

三、对发酵工程的推动作用12

第三节　生物技术在植物保护上的应用概况14

一、组织培养技术的应用概况14

二、转基因育种技术的应用概况15

三、发酵技术的应用概况15

四、分子生物学技术的应用概况16

第二章　植物组织培养技术在植物保护上的应用17

第一节　植物组织培养的基本原理和一般程序17

一、植物组织培养的基本原理及发展简史17

二、植物组织培养的一般程序17

第二节　植物抗病细胞突变体筛选19

一、植物抗病细胞突变体筛选的基本原理19

二、植物抗病细胞突变体筛选的一般程序20

三、植物抗病细胞突变体筛选的实例23

第三节　抗病虫细胞工程育种28

一、抗病虫花培单倍体育种28

二、抗病虫体细胞杂交育种32

第四节　茎尖脱毒38

一、茎尖脱毒的基本原理38

二、茎尖脱毒的一般程序39

三、茎尖脱毒的实例43

第三章　重组DNA技术在植物保护上的应用60

第一节　重组DNA技术60

一、工具菌60

二、工具酶64

三、载体68

四、DNA重组技术的步骤81

第二节 目的基因的获得99

一、目的基因的来源和种类99

二、目的基因的获取109

三、获取目的基因的个例112

第三节　植物转化技术114

一、表达构建体的组合115

二、将构建体导入植物转化载体115

三、用重组的植物转化载体转化根癌土壤杆菌116

四、用转化了重组植物转化载体的根癌土壤杆菌转化植物116

五、检验转基因植株及其后代117

第四章　微生物发酵技术在植物保护上的应用118

第一节　发酵技术的基本知识118

一、发酵技术的内容118

二、发酵技术的特点及应用119

三、发酵设备121

第二节　微生物发酵过程123

一、微生物发酵的基本过程123

二、发酵的操作方式126

三、发酵工艺控制128

四、发酵过程中的检测132

第三节　杀虫微生物的发酵生产133

一、苏云金芽孢杆菌的选育和发酵生产133

二、核多角体病毒的选育和生产137

三、白僵菌和绿僵菌的选育和发酵生产139

第四节　杀菌微生物的发酵生产143

一、微生物抑制病原菌的作用机制143

二、木霉菌的选育和发酵生产145

三、抗病芽孢杆菌的选育和发酵生产147

第五节　除草微生物的选育和发酵生产148

一、真菌除草剂149

二、细菌除草剂150

三、微生物除草剂的作用机制150

四、微生物除草剂存在的问题和相应的措施154

第六节　产抗生素微生物的发酵生产154

一、农用抗生素的类别155

二、产抗生素微生物的筛选过程156

三、产杀虫抗生素链霉菌的选育和发酵生产156

四、产杀菌抗生素链霉菌的选育和发酵生产160

第五章　分子生物学技术在植物保护上的应用162

第一节　蛋白质检测技术163

一、酶联免疫吸附测定163

二、免疫印迹技术168

第二节　核酸杂交检测技术169

一、原理169

二、核酸分子杂交中的探针170

三、核酸分子的杂交方法175

四、影响核酸分子杂交的因素182

第三节 PCR技术183

一、PCR的原理183

二、PCR反应中的主要成分184

三、PCR反应参数188

四、PCR扩增产物的检测190

五、PCR操作过程191

六、PCR的特点192

七、PCR的类型193

第四节　DNA分子标记198

一、第一代分子标记198

二、第二代分子标记201

三、第三代分子标记201

第五节　实时荧光定量PCR检测技术202

一、实时荧光定量PCR技术的原理202

二、实时荧光定量PCR技术的种类202

三、实时荧光定量PCR技术的特点205

第六节　生物芯片技术206

一、工作原理206

二、生物芯片的分类210

第七节　其他检验技术211

一、连接酶链反应212

二、依赖核酸序列的扩增212

三、转录依赖的扩增系统213

四、Qβ复制酶反应213

第八节　分子生物学技术在植物保护上的应用213

一、分子生物学技术在植物病害诊断上的应用214

二、分子生物学技术在昆虫学研究上的应用217

主要参考文献219